期刊简介
本刊将尽力满足全科医学教学和临床的需要，做到理论与实践结合，普及与提高并重，活跃学术思想，促进改革创新，强调刊物的科学性、思想性、先进性、启发性和实用性。
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- 杂志名称：全科医学临床与教育杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：浙江大学
- 国际刊号：1672-3686
- 国内刊号：33-1311/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
利用TaqMan技术定量检测基因表达的引物探针设计
张行；叶景佳；魏群；陈萍；王琦；曹江
关键词：TaqMan技术, 基因表达, 定量PCR
摘要：目的 建立优化的实时荧光定量PCR的引物探针设计参数.方法 设计引物和探针时的原则包括:①上、下游引物的融解温度(Tm值)应尽量相同或相差越小越好,以利于PCR退火温度的优化;②扩增区域应当跨越不同的外显子(在基因组DNA上至少一个以上的内含子),以利于区分基因组DNA扩增产物和cDNA扩增产物;③引物和探针的位置好位于外显子和内含子交界处,以避免引物和探针与基因组DNA的结合;④扩增区域好靠近基因的3'端,以减少不完全逆转录的影响.本次研究设计了实时荧光定量RT-PCR检测人甲胎蛋白mRNA的引物和探针,并提取临床肝癌组织标本中的RNA,检测其中甲胎蛋白的表达.结果 本次研究设计的实时荧光定量RT-PCR检测甲胎蛋白mRNA的引物和探针具有良好的特异性,可用于临床标本的检测.结论 本次研究确定的原则对提高利用TaqMan技术定量检测目的 基因结果 的可靠性具有很好的指导意义.
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